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    Sleeping Beauty轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)由Sleeping Beauty(SB)轉(zhuǎn)座酶和轉(zhuǎn)座子組成,SB轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)可將特定的DNA序列插入脊椎動(dòng)物的基因組中。 DNA轉(zhuǎn)座子以剪切/粘貼的方式,將一條DNA片段轉(zhuǎn)移到另一條DNA片段上。轉(zhuǎn)座(Transposition)是一個(gè)精確的過(guò)程,在供體DNA分子中剪切特定的DNA片段,然后移至相同或不同DNA分子或基因組中的另一個(gè)位點(diǎn)。
    2020-12-07
    通過(guò)CUY21EDITⅡ電轉(zhuǎn)儀導(dǎo)入CRISPR RNPs(RNPs: Cas9蛋白/Cpf1蛋白 + gRNA)進(jìn)入第0.7天孕鼠體內(nèi),使其適合常規(guī)基因?qū)?,提供單鏈DNA(ssDNA)修復(fù)模板后,i-GONAD還可以生成包含多達(dá)1kb插入片段的敲入模型,基因編輯效率更高。i-GONAD還具有其他優(yōu)勢(shì):不需要切除輸卵管或子宮,使用i-GONAD的雌鼠不會(huì)被處死,還可以用于其他實(shí)驗(yàn),掌握小動(dòng)物手術(shù)的研究人員在沒(méi)有精密顯微注射設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室中就能輕松進(jìn)行,高效同時(shí)也節(jié)省成本。
    2020-10-12
    總蛋白歸一化(Total protein normalization)是目前最可靠的WB實(shí)驗(yàn)蛋白歸一化方法??偟鞍讱w一化在靈敏度,可重復(fù)性方面均優(yōu)于看家蛋白實(shí)驗(yàn)方式,研究者需要熒光成像系統(tǒng)和熒光染料標(biāo)記的二抗,就可以進(jìn)行總蛋白歸一化精確定量上樣蛋白。
    2020-09-28
    數(shù)字PCR是將PCR反應(yīng)分成許多單元,每個(gè)單元中都包含離散數(shù)量的靶基因拷貝(0,1,2,3 ,……)。數(shù)字PCR這項(xiàng)強(qiáng)大的技術(shù),使得核酸定量,基因型檢測(cè)等應(yīng)用的檢測(cè)限更低,檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。本文從分區(qū)的優(yōu)點(diǎn)和泊松統(tǒng)計(jì)開(kāi)始,包括誤差的來(lái)源方面,探討一下數(shù)字PCR的數(shù)學(xué)原理。我們討論比較五種商品化的數(shù)字PCR儀器,主要分為芯片型(cdPCR)和液滴型(ddPCR)的兩種,并對(duì)市面上主流的數(shù)字PCR參數(shù)進(jìn)行了比較。
    2020-09-15
     

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